¡El agente quimioluminiscente utilizado para la luminiscencia es muy diferente!
October 23 , 2024
¡La tecnología de inmunoensayo de quimioluminiscencia es bien conocida desde hace mucho tiempo en el campo del diagnóstico in vitro! Estos incluyen quimioluminiscencia directa, electroquimioluminiscencia, quimioluminiscencia enzimática y quimioluminiscencia indirecta. ¡Hay tantos tipos de luminiscencia que utilizan agentes luminiscentes que también son muy diferentes! 1. Éster de acridina
Quimioluminiscencia directa
El éster de acridina (AE) es un compuesto orgánico tricíclico que es susceptible a la oxidación. Cuando se oxida con H2O2 en condiciones alcalinas, emite luz con una longitud de onda de 470 nm y tiene una alta eficiencia luminosa. Su producto excitado N-metilacridona es la luminita del sistema de reacción de luminiscencia. Se utiliza para el marcaje de haptenos y proteínas o anticuerpos policlonales o monoclonales.
Es una sustancia sintética, que no existe en la naturaleza, por lo que no hay interferencias de ruido de fondo; El éster de acridina es relativamente insensible a los cambios de pH y temperatura. Al mismo tiempo, su peso molecular es solo 481, el efecto de obstáculo espacial es pequeño y la reacción de oxidación no necesita un catalizador, siempre que pueda llevarse a cabo en un ambiente alcalino.
La luminiscencia reacciona rápidamente y tiene un fondo bajo. Durante la reacción de oxidación, el conjugado se descompone, por lo que no se inhibe la luminiscencia del éster de acridina libre y el reactivo tiene buena estabilidad. Es una excelente opción de agente luminiscente en la industria.
Terapridina rutenio [RU(bpy)3]2+ es un agente electroquimioluminiscente que se oxida con la tripropilamina donante de electrones (TPA) en la superficie del ánodo. Marcado directo de antígenos o anticuerpos.
La luminiscencia se caracteriza por una emisión de luz estable de solo 0,01 ms, alcanzando un pico a 300 ms, y el ciclo de electroquimioluminiscencia de cientos de miles de ciclos por segundo mejora en gran medida la sensibilidad del análisis.
El marcado es estable y fácil de controlar, pero el campo eléctrico requiere una celda de medición especial, y se necesitan entre 40 y 60 segundos para limpiar la celda de medición después de cada medición para restaurar el electrodo al estado, lo cual es fácil de causar. contaminación cruzada, afecta la precisión de los resultados y reduce la velocidad del análisis.
3.Luminol y sus derivados
Quimioluminiscencia enzimática
El luminol (3-aminobenzoilhidrazida), el isoluminol (4-aminobenzoilhidrazida) y sus derivados tienen propiedades quimioluminiscentes.
En solución neutra: normalmente presente como iones dipolo (zwitteriones).
En solución alcalina: se convierte en un anión divalente, que puede ser oxidado por moléculas de oxígeno en un intermedio que puede producir un fenómeno de quimioluminiscencia.
En oxidantes: el luminol se convierte a un estado excitado, que decae al estado fundamental y emite fluorescencia.
4. adamantano AMPPD
Quimioluminiscencia enzimática
En general, la estructura de adamantano es muy estable, pero cuando se encuentra la fosfatasa alcalina, la fosfatasa alcalina catalizará el adamantano para eliminar el grupo fosfato y formar un intermedio inestable, que se descompondrá automáticamente y producirá una señal luminosa de 470 nm, que puede durar decenas de minutos a varias horas.
5. Quimioluminiscencia fotoinducida
peculiaridad
Tiempo de reacción corto: un patrón de reacción homogéneo.
Alta sensibilidad: el proceso de reacción se amplifica paso a paso y la luminiscencia mejora rápidamente la sensibilidad.
Buena estabilidad: todo el proceso de generación, transferencia y amplificación de energía (luz) es muy estable y no se ve afectado fácilmente por el pH, la fuerza iónica y la temperatura.